Oxacillin disk diffusion testing for the prediction of penicillin resistance in Streptococcus pneumoniae / Prueba de difusión con discos de oxacilina para predecir la resistencia a la penicilina de Streptococcus pneumoniae

ABSTRACT Objective To 1) describe the correlation between the zones of inhibition in 1-µg oxacillin disk diffusion (ODD) tests and penicillin and ceftriaxone minimum inhibitory concentrations (MICs) of meningeal and non-meningeal strains of Streptococcus pneumoniae and 2) evaluate the usefulness of the ODD test as a predictor of susceptibility to penicillin in S. pneumoniae and as a quick and cost-effective method easily implemented in a routine clinical laboratory setting. Methods S. pneumoniae isolates from healthy nasopharyngeal carriers less than 2 years old, obtained in a multicentric cross-sectional study conducted in various Peruvian hospitals and health centers from 2007 to 2009, were analyzed. Using Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) breakpoints, the correlation between the zones of inhibition of the ODD test and the MICs of penicillin and ceftriaxone was determined. Results Of the 571 S. pneumoniae isolates, 314 (55%) showed resistance to penicillin (MIC ≥ 0.12 µg/mL) and 124 (21.7%) showed resistance to ceftriaxone (MIC ≥ 1 µg/mL). Comparison of the ODD test zones of inhibition and the penicillin MICs, using the CLSI meningeal breakpoints, showed good correlation (Cohen’s kappa coefficient = 0.8239). Conclusions There was good correlation between ODD zones of inhibition and penicillin meningeal breakpoints but weak correlation between the ODD results and non-meningeal breakpoints for both penicillin and ceftriaxone. Therefore, the ODD test appears to be a useful tool for predicting penicillin resistance in cases of meningeal strains of S. pneumoniae, particularly in low- and middle- income countries, where MIC determination is not routinely available.

RESUMEN Objetivo 1) Describir la correlación entre las zonas de inhibición observadas en la prueba de difusión con discos de oxacilina de 1 µg y la concentración inhibitoria mínima (CIM) de penicilina y ceftriaxona frente a cepas meníngeas y no meníngeas de Streptococcus pneumoniae y 2) evaluar si la prueba de difusión con discos de oxacilina permite predecir la sensibilidad de S. pneumoniae a la penicilina y sirve como método rápido y eficaz en función de los costos, y resulta fácil de aplicar en los laboratorios clínicos ordinarios. Métodos Se analizaron colonias de S. pneumoniae aisladas de la nasofaringe de portadores sanos menores de 2 años obtenidas en un estudio transversal multicéntrico realizado en diversos hospitales y centros de salud del Perú entre los años 2007 y 2009. Se determinó la correlación entre las zonas de inhibición observadas en la prueba de difusión con discos y la CIM de la penicilina y la ceftriaxona utilizando los valores críticos definidos por el Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio. Resultados De las 571 colonias aisladas de S. pneumoniae, 314 (55 %) presentaron resistencia a la penicilina (CIM ≥ 0,12 µg/ml) y 124 (21,7%), resistencia a la ceftriaxona (CIM ≥ 1 µg/ml). Se observó una buena correlación (coeficiente κ de Cohen = 0,8239) entre las zonas de inhibición de la prueba de difusión con discos y la CIM de la penicilina utilizando los valores críticos del Instituto respecto de las cepas meníngeas. Conclusiones Se encontró una buena correlación entre las zonas de inhibición de la prueba de difusión con discos y los valores críticos de CIM de la penicilina respecto de las cepas meníngeas, pero una correlación débil entre los resultados de la prueba de difusión y los valores críticos tanto de la penicilina como de la ceftriaxona respecto de las cepas no meníngeas. Por consiguiente, la prueba de difusión con discos es un método de utilidad para predecir la resistencia a la penicilina de las cepas meníngeas de S. pneumoniae, en particular en los países de ingresos bajos y medianos, donde no suele ser posible determinar la CIM.

Identificación de especies de Malassezia aisladas de piel sana en pobladores de Lima, Perú / Identification of Malassezia species isolated from healthy skin in residents of Lima, Peru

Objetivo: Identificar las especies de Malassezia en zonas seborreicas de piel sana en población limeña. Diseño: Estudio descriptivo transversal. Lugar: Instituto de Medicina Tropical æDaniel Alcides CarriónÆ, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú. Participantes: Pobladores asintomáticos. Intervenciones: Empleando la técnica de Mariat y Adan-Campos, se recolectó muestras de piel de 129 pobladores asintomáticos de diversos distritos de la ciudad de Lima. El aislamiento de Malassezia se realizó en medio Dixon modificado e incubado a 32 grados centígrados por 7 días, la identificación de las colonias por sus características macro y micromorfológicas, y la tipificación mediante el estudio de las propiedades bioquímicas y fisiológicas según la técnica de Guillot y col. Principales medidas de resultados: Especie de Malassezia, sexo, edad y región anatómica. Resultados: Se aisló Malassezia spp en 43,4 por ciento de los pobladores, obteniéndose 49,2 por ciento en varones y 37,5 por ciento en mujeres. De las diferentes regiones corporales, 68 cultivos fueron positivos: cuero cabelludo 31 (45,6 por ciento), espalda 36 (52,9 por ciento) y región frontal 1 (1,5 por ciento). El grupo etario con mayor frecuencia de aislamientos (47,2 por ciento) fue el de 14 a 25 años (adolescentes jóvenes). M. slooffiae fue encontrado en 83,8 por ciento y M. obtusa en 16,2 por ciento de los casos. Conclusiones: Se encontró Malassezia spp. en la piel humana sana. M. slooffiae fue la especie predominante de los casos positivos (83,8 por ciento) seguido de M. obtusa (16,2 por ciento)...

Objective: To identify Malassezia species in healthy skin seborrhea areas in Lima inhabitants. Design: Cross-sectional study. Setting: Daniel Alcides Carrion Tropical Medicine Institute, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Peru. Participants: Asymptomatic persons. Interventions: Skin samples were collected from 129 asymptomatic residents of several districts of Lima city using Mariat and Adan-CamposÆ technique. Malassezia isolation was performed in modified Dixon medium and incubated at 32 grades centigrades for 7 days. Colonies were identified by macro and micro morphological characteristics and typing was determined by biochemical and physiological properties using GuillotÆs technique. Main outcome measures: Malassezia species, participantsÆ gender, age and anatomical region. Results: Malassezia spp was isolated in 43.4 per cent of the residents, 49.2 per cent in men and 37.5 per cent in women. From various body regions 68 cultures were positive: scalp 31 (45.6 per cent), back 36 (52.9 per cent) and frontal region 1 (1.5 per cent). Isolates most common age group (47.2 per cent) was that of adolescents-young (14-25 year-old). M. slooffiae was found in 83.8 per cent and M. obtusa in 16.2 per cent of cases. Conclusions: Malassezia spp. was present in healthy human skin. M. slooffiae was the predominant species in positive cases (83.8 per cent) followed by M. obtusa (16.2 per cent)...

Hallazgo de Lophomonas sp. en secreciones del tracto respiratorio de niños hospitalizados con enfermedad pulmonar grave / Lophomonas sp. in respiratory tract secretions in hospitalized children with severe lung disease

Lophomonas sp. es un parásito habitual del tracto intestinal de las cucarachas y que no es reconocido como patógeno humano. Sin embargo, en la literatura mundial existen escasos reportes de Lophomonas sp. en secreciones del tracto respiratorio en pacientes con enfermedad pulmonar grave, principalmente en adultos. Presentamos evidencias de Lophomonas sp. en el tracto respiratorio inferior de niños atendidos en el centro de referencia nacional de enfermedades pediátricas de Lima, Perú, en el periodo 2009-2010. Se encontró seis casos, 4/23 provenientes de muestras de lavado broncoalveolar y 2/794 muestras de aspirado traqueal de niños. Cinco de ellos tuvieron neumonía y uno atelectasia, cuatro estuvieron en la unidad de cuidados intensivos. Es necesario conocer más sobre la presencia de este organismo en infecciones respiratorias así como su rol patogénico real.

Lophomonas sp. is a habitual parasite of the intestinal tract of the cockroaches and that is not recognized as pathogenic human being. Nevertheless, in the world literature are few reports of Lophomonas sp. in respiratory tract secretions in patients with severe pulmonary disease, mostly in adults. We present evidences of Lophomonas sp. in the respiratory low tract of children attended in the national reference center of paediatric diseases of Lima, Peru, in the period 2009- 2010. We found six cases, 4/23 from broncoalveolar lavage and 2/794 from tracheal aspirate samples of children. Five of them had pneumonia and one atelectasis, four were hospitalized in the intensive care unit. Increase knowledge about the presence of this organism in respiratory infections is needed, as its real pathogenic role.

Staphylococcus aureus resistente a meticilina adquirido en la comunidad aislados en tres hospitales de Lima-Perú / Methicillin resistant Staphylococcus aureus isolates acquired in the community in three hospitals in Lima, Peru

Staphylococcus aureus es un importante patógeno involucrado en una serie de infecciones e intoxicaciones, presenta múltiples factores de virulencia y su impacto se incrementa por su notable resistencia a los antimicrobianos. Objetivo: Determinar la frecuencia de Staphylococcus aureus meticilino resistente adquiridos en la comunidad, en hospitales de Lima- Perú. Material y métodos: Se realizó un estudio descriptivo multicéntrico. La resistencia a meticilina se determinó por el método Oxacillin Agar Screen. El origen de la cepa fue determinado mediante los criterios de los CDC; la Leucocidina de Panton Valentine fue identificada por métodos moleculares. Resultados: Se aislaron 276 cepas de Staphylococcus aureus, 160 fueron resistentes a meticilina (58 por ciento), 9 de ellas fueron identificadas como adquiridas en la comunidad (5,6 por ciento). La PVL fue identificada en 25 cepas (9,1 por ciento), 14 fueron MSSA y 11 MRSA, de éstas últimas solo 4 fueron MRSAcom, 7 fueron MRSAhosp (p menor que 0,001). Conclusiones: El estudio revela niveles elevados de resistencia a meticilina, pero niveles bajos de MRSAcom. En nuestro medio la presencia de PVL no constituiría un marcador para la identificación de los MRSAcom.

Background: Staphylococcus aureus is an important pathogen involved in a series of infections and toxin mediated syndromes, has many virulence factors and its impact increases its resistance to antimicrobial agents. Objectives: To determine the frequency of community acquired methicillin resistant Staphylococcus aureus among hospitals in Lima -Peru. Material and Methods: We performed a prospective multicenter study. The resistance to methicillin was determined by the Oxacillin Agar Screen method. The origin of the strain was determined using CDC criteria, the Panton Valentine Leucocidin was identified by molecular methods. Results: We isolated 276 strains of Staphylococcus aureus, 160 were resistant to methicillin (58 per cent). 9 strains were identified as community acquired MRSA (5.6 per cent). The Panton Valentine Leucocidin was identified in 25 strains (9.1 per cent), 14 were MSSA and 11 MRSA, only 4 of the latter were CA MRSA, 7 were HA MRSA (p less than 0.001). Conclusions: The study showed frequencys of methicillin resistance, but low CA MRSA. In our environment the presence of PVL would not be a marker for the identification of CA MRSA.

Streptococcus pneumoniae aislados durante 2002-2006: serotipos y resistencia antibiótica. Correlación con las vacunas existentes / Streptococcus pneumoniae isolated during 2002-2006: serotypes and antibiotics resistance. Correlation with existing vaccines

Objetivos: Identificar los serotipos de S. pneumoniae aislados, correlacionándolos con los incluidos en las vacunas existentes y su resistencia antimicrobiana. Diseño: Estudio descriptivo, observacional y longitudinal. Lugar: Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión, Facultad de Medicina, UNMSM. Material biológico: Cepas de Streptococcus pneumoniae. Intervenciones: Cuarenta Streptococcus pneumoniae de nuestro cepario, aislados entre el 2002 y 2006, fueron serotipificados en el Instituto de Salud Carlos III en Madrid ûEspaña; 15 fueron invasivos, 11 aislados de infecciones localizadas, 6 de portadores y 8 eran multiresistentes. Principales medidas de resultados: Protección de las vacunas existentes en nuestro medio a las infecciones causadas por Streptococcus pneumoniae. Resultados: Hubo 14 serotipos diferentes y los serogrupos más identificados fueron 23, 19 y 6. El 28,6 por ciento estaba contenido en la vacuna 7ûvalente, 42,9 por ciento en la 9ûvalente, 50 por ciento en la 11ûvalente y el 71,4 por ciento en la 23ûvalente; 57,5 por ciento fue resistente a la penicilina y 30 por ciento a eritromicina. El grupo de Streptococcus invasivo resultó más sensible a los antibióticos que los otros grupos. Los serotipos asociados a multirresistencia fueron 19F y 23F. Conclusiones: Ninguna de las vacunas protege a todas las infecciones causadas por Streptococcus pneumoniae, en nuestro medio.

Objectives: To identify isolated S. pneumoniae serotypes correlating them with those covered by existing vaccines and determining antimicrobial resistance. Design: Descriptive, observational and longitudinal study. Setting: Daniel A Carrion Tropical Medicine Institute, School of Medicine, UNMSM. Biologic material: Streptococcus pneumoniae stocks. Interventions: Forty Streptococcus pneumoniae stocks isolated between 2002 and 2006 were serotyped at Carlos III Health Institute in Madrid, Spain; 15 were invasive, 11 isolated from localized infections, 6 from carriers and 8 were multiresistant. Main outcome measures: Protection of local existing vaccines to Streptococcus pneumoniae infections. Results: There were 14 different serotypes and most identified groups were 23, 19 and 6, 28,6 per centcontained in the 7ûvalent vaccine, 42,9 per cent in the 9-valent, 50 per cent in the 11-valent and 71,4 per cent in the 23-valent; 57,5 per cent were resistant to penicillin and 30 per cent to erythromycin. The invasive Streptococcus group proved to be more sensitive to antibiotics than the other groups; 19F and 23F serotypeswere multiresistant. Conclusions: In our environment none of the studied vaccines protected all the infections caused by Streptococcus pneumoniae. Resistance to penicillin was high.

Sensibilidad bacteriana a las cefalosporinas de tercera y cuarta generación en diferentes áreas hospitalarias: estudio multicéntrico / Study multicéntric: bacterial sensitivity to third and fourth generation cephalosporins in differents areas hospitable

Se presenta un estudio prospectivo de corte transversal, de vigilancia epidemiológica, para determinar la sensibilidad bacteriana, por Servicio Hospitalario, a cefalosporinas de tercera y cuarta generación (ceftriaxona, cefotaxina, ceftazidima, cefoperazona y cefepime) mediante la prueba de disco de Kirby Bauer. Se incluyeron muestras bacteriológicas de 13 centros: 10 de Lima, dos de Arequipa y uno de Chiclayo. La sensibilidad más alta de Staphylococcus aureus se encontró en los servicios ambulatorios (Consulta Externa y Urgencia), situación que disminuyó casi a la mitad en los servicios de hospitalización (Medicina Interna, Cirugía y Cuidados Críticos). La sensibilidad de E.coli no mostró variación entre los servicios, a excepción de ser de menor grado en la Unidad de Cuidados Críticos. Las cepas de klebsiella pneumoniae y Enterobacter aerogenes aisladas en Consulta Externa, mostraron ser más sensibles que las procedentes de áreas de hospitalización, sobre todo Medicina Interna y Cirugía. La sensibilidad de Pseudomonas aeruginosa fue más alta en las muestras obtenidas en los servicios ambulatorios. Klebsiella, Enterobacter y Pseudomonas fueron más sensibles a cefepime que a ceftazidima. Se concluye que, según el Servicio de referencia de la muestra, hay variación en la sensibilidad bacteriana a cefalosporinas de tercera y cuarta generación

Tinta china modificada para la detección de formas encapsuladas de Blastocystis hominis / Modified India ink for detection of capsulated forms of Blastocystis hominis

Se estudió la presencia de formas encapsuladas de Blastocystis hominis en 400 muestras fecales de pacientes pediátricos en los que se había detectado previamente este agente con salino y lugol. Se utilizó la técnica de tinta china modificada para visualizar la cápsula. De ese total, 120 muestras (30 por ciento) resultaron positivas. Se propone el uso de esta técnica para identificar las formas encapsuladas de B. hominis, puesto que la cápsula podría ser un factor de patogenicidad del agente

Vigilancia epidemiológica de susceptibilidad bacteriana a las cefalosporinas de tercera y cuarta generación. Estudio multicéntrico / Epidemiologic surveillance of bacterial susceptibility to the cephalosporines of third and fourth generation: multicenter study

Objetivo: Determinar la susceptibilidad bacteriana a cefalosporinas de tercera y cuarta generación en centros hospitalarios en Perú. Métodos: Estudio prospectivo de corte transversal, de vigilancia epidemiológica. Se incluyeron muestras bacteriológicas de 13 centros, 10 de Lima, 2 de Arequipa y uno de Chiclayo, las que fueron tipificadas de acuerdo a los criterios del NCCLS. Se determinó la susceptibilidad para ceftriaxone, cefotaxime, ceftazidime, cefoperazone y cefepime, mediante el método de disco de Kirby Bauer.Resultados: La sensibilidad de las bacterias grampositivas fue de 79 por ciento a cefepime, de 72 por ciento a cefoperazone, de 71 por ciento a cefotaxime y de 71 por ciento a ceftriaxone. La susceptibilidad de Staphylococcus aureus para cefepime fue de 74 por ciento, para cefotaxime de 67 por ciento, seguido de las otras cefalosporinas. La susceptibilidad de 77 cepas de Streptococcus pneumoniae fue igual o mayor al 90 por ciento para todas las cefalosporinas. De 1,645 bacterias gramnegativas, el 93 por ciento fue susceptible a cefepime, el 87 por ciento a ceftazidime, seguidas por ceftriaxone, cefoperazone y cefotaxime. La susceptibilidad para E. coli estuvo encima del 90 por ciento para todas las cefalosporinas. El 93 por ciento de las cepas de Klebsiella pneumoniae fue susceptible a cefepime, el 81 por ciento a ceftazidime, seguidas por las otras sefalosporinas. De forma similar la susceptibilidad de Enterobacter cloacae fue mayor para cefepime (89 por ciento) y ceftazidime (80 por ciento). La susceptibilidad para Pseudomona aeruginosa fue de 83 por ciento para cefepime y de 81 por ciento para ceftazidime. Conclusiones: En el estudio se encuentra que la resistencia bacteriana a cefalosporinas de tercera generación está presente en los centros hospitalarios del Ministerio de Salud, IPSS, clínicas privadas y Hospital Militar, manteniéndose un buen nivel de susceptibilidad para cefalosporinas de cuarta generación.

Infección urinaria: Estudio prospectivo del valor diagnóstico de pruebas de tamizaje en niños preescolares hospitalizados / Urinary tract infection: A prospective assessment of diagnostic accuracy of rapid dipstick tests in hospitalized toddlers

Se evaluó prospectivamente de mayo 1994 a junio 1995 la utilidad diagnóstica de nitrito, leucocitoesterasa y leucocituria para el diagnóstico de infección urinaria en 108 pacientes hospitalizados menores de 2 años de edad. Las muestras de orina fueron tomadas por punción suprapúbica. La prevalencia de infección urinaria fue de 10 por ciento (11 de 108 pacientes). La sensibilidad (S) y el valor predictivo negativo (VPN) fueron de 100 por ciento para leucocitoesterasa (criterio de positividad 10-25 leucocitos/ml)o para nitrito (criterio de postiivdad cualquier cambio de color). Sin embargo, la especificidad (E) y el valor predictivo positivo (VPP) fueron afectados sustancialmente con dichos umbrales de positividad. La S fue de 82 por ciento y el VPP de 100 por ciento para leucocitoesterasa, con criterio de positividad 500/ml. Para nitrito, con criterio de positividad que excluyó los cambios de color débiles, S fue de 91 por ciento y VPP de 43 por ciento. La especificidad y el valor predictivo negativo se mantuvieron cercanos a 100 por ciento para cualquiera de las pruebas con estos umbrales. La leucocituria tuvo, en general, bajo rendimiento comparaa con las dos pruebas anteriores. La concordancia entre nitrito y leucocitoesterasa fuertemente positivos fue del 100 por ciento. Casi la mitad de los 11 pacientes con urocultivo postivo presentó anormalidades en la ecografía o en la cistouretrografía miccional. Se recomienda iniciar de inmediato el tratamiento de los pacientes cuando la orina tomada por punción suprapúbica resulte fuertemente positiva tanto para leucocitoesterasa como para nitrito. En los casos positivos para leucocitoesterasa solamente o para nitrito solamente, la decisión de iniciar tratamiento dependerá del juicio clínico. Debe realizarse sistemáticamente tanto ecografía renal como cistouretrografía miccional en lactantes y niños menores de 2 años con diagnóstico definido de infección urinaria.